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[(微)生物] 技术问题： DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇？ [复制链接]

Guessy
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楼主

发表于 2008-11-19 16:44:09 |只看该作者 |倒序浏览

DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇？
如果直接用乙醇会有什么影响？

最好能给出有价值的参考文献什么的
找了一晚上没找到
谢谢了！

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Elaine
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沙发

发表于 2008-11-20 08:51:08 |只看该作者

我自己的理解是ethanol比isopropanol的molecular weight要小，所以更容易挥发，而且不稳定，所以沉淀时用到的alcohol是isopropanol, 而后来因为要等DNA dry,所以用ethanol更快。（这个纯粹是我自己在做miniprep的时候想的，所以楼主不到最后不要用）

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Guessy
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板凳

发表于 2008-11-20 11:42:30 |只看该作者

原则上讲我应该是知道答案的
因为异丙醇和DNA亲和性好用来分离
乙醇的亲和性差适合挥发
但我实在找不到什么出处

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so猫
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地板

发表于 2008-11-22 06:35:57 |只看该作者

我印象中谁告诉我不用异丙醇的话~ 会飘~

具体的忘了

True love never runs smooth.

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linxiaosi
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5楼

发表于 2008-11-22 09:28:39 |只看该作者

DNA在异丙醇的溶解度更低，所以用异丙醇来沉淀更完全，而后由于异丙醇不易挥发，所以用乙醇洗去异丙醇，乙醇挥发快
个人见解

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樊水以东
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6楼

发表于 2008-11-22 16:41:43 |只看该作者

一般片段小于500bp我才用异丙醇，抽屉质粒之类的就直接上乙醇

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withthemoon
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7楼

发表于 2008-11-22 21:28:14 |只看该作者

同意5楼的观点

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sovereignlin
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8楼

发表于 2008-12-6 21:31:08 |只看该作者

学习了，:)

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coollester
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9楼

发表于 2009-1-20 13:07:06 |只看该作者

5楼正解

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Guessy
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10楼

发表于 2009-1-21 05:42:48 |只看该作者

唉发个最终版的答案吧反正是老师最后说的
异丙醇和DNA的亲和性高可以用更少的量来沉淀
但同时异丙醇和盐的亲和性也高所以用乙醇把盐洗出去
可惜我到最后也没找到引用文献随便引了个分子克隆手册就交了

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zhouxfd
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11楼

发表于 2009-1-21 20:51:50 |只看该作者

直接用乙醇就行，别用异丙醇了。

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Guessy
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12楼

发表于 2009-1-22 02:30:20 |只看该作者

直接用乙醇就行，别用异丙醇了。
zhouxfd 发表于 2009-1-21 20:51

确实可以
但问为什么用异丙醇是我们final report里面一道小题。。。

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kuaikuai
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13楼

发表于 2009-1-30 03:57:42 |只看该作者

Iso is used to precipitate the DNA, EoTH is to used to get rid of the salt. You can also use EoTH to precipitate DNA, but it takes longer.

I will go...

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Guessy
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14楼

发表于 2009-1-30 04:50:46 |只看该作者

求求大家别回复这个帖子了我已经知道答案n久了那门课的成绩都出来2个月了。。。

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dongyu0835
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15楼

发表于 2009-5-7 08:00:13 |只看该作者

14# Guessy
那你说说到底是为什么，要把问题解决了啊

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