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技术问题: DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇?
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[(微)生物]
技术问题: DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇?
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Guessy
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电梯直达
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发表于 2008-11-19 16:44:09
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只看该作者
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倒序浏览
DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇?
如果直接用乙醇会有什么影响?
最好能给出有价值的参考文献什么的
找了一晚上没找到
谢谢了!
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沙发
发表于 2008-11-20 08:51:08
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只看该作者
我自己的理解是ethanol比isopropanol的molecular weight要小,所以更容易挥发,而且不稳定,所以沉淀时用到的alcohol是isopropanol, 而后来因为要等DNA dry,所以用ethanol更快。(这个纯粹是我自己在做miniprep的时候想的,所以楼主不到最后不要用)
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Guessy
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板凳
发表于 2008-11-20 11:42:30
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只看该作者
原则上讲我应该是知道答案的
因为异丙醇和DNA亲和性好 用来分离
乙醇的亲和性差 适合挥发
但我实在找不到什么出处
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so猫
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地板
发表于 2008-11-22 06:35:57
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只看该作者
我印象中谁告诉我不用异丙醇的话~ 会飘~
具体的忘了
True love never runs smooth.
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linxiaosi
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linxiaosi
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发表于 2008-11-22 09:28:39
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只看该作者
DNA在异丙醇的溶解度更低,所以用异丙醇来沉淀更完全,而后由于异丙醇不易挥发,所以用乙醇洗去异丙醇,乙醇挥发快
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樊水以东
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樊水以东
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发表于 2008-11-22 16:41:43
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只看该作者
一般片段小于500bp我才用异丙醇,抽屉质粒之类的就直接上乙醇
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withthemoon
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withthemoon
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发表于 2008-11-22 21:28:14
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只看该作者
同意5楼的观点
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sovereignlin
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sovereignlin
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发表于 2008-12-6 21:31:08
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只看该作者
学习了,:)
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coollester
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coollester
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发表于 2009-1-20 13:07:06
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只看该作者
5楼正解
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OFFER:3
interview:5
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Guessy
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楼
发表于 2009-1-21 05:42:48
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只看该作者
唉 发个最终版的答案吧 反正是老师最后说的
异丙醇和DNA的亲和性高 可以用更少的量来沉淀
但同时异丙醇和盐的亲和性也高 所以用乙醇把盐洗出去
可惜我到最后也没找到引用文献 随便引了个分子克隆手册就交了
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zhouxfd
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楼
发表于 2009-1-21 20:51:50
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只看该作者
直接用乙醇就行,别用异丙醇了。
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Guessy
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楼
发表于 2009-1-22 02:30:20
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只看该作者
直接用乙醇就行,别用异丙醇了。
zhouxfd 发表于 2009-1-21 20:51
确实可以
但问为什么用异丙醇是我们final report里面一道小题。。。
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楼
发表于 2009-1-30 03:57:42
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只看该作者
Iso is used to precipitate the DNA, EoTH is to used to get rid of the salt. You can also use EoTH to precipitate DNA, but it takes longer.
I will go...
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Guessy
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发表于 2009-1-30 04:50:46
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只看该作者
求求大家别回复这个帖子了 我已经知道答案n久了 那门课的成绩都出来2个月了。。。
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dongyu0835
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发表于 2009-5-7 08:00:13
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只看该作者
14#
Guessy
那你说说到底是为什么,要把问题解决了啊
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也不是,目前录得两个ee背景感觉都是合作院校点击就送,有待商榷,一个北理一个深大。
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【问答/丹麦】dtu的申请系统经常登不上去,是什么情况呀?
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要用他发你邮件的那个链接进去,复制了打开,用书签保存的不行。
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