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[(微)生物] 技术问题: DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇? [复制链接]

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囧章 Gemini双子座 枫情万种 一帆枫顺   枫华绝代 荣誉版主

发表于 2008-11-19 16:44:09 |显示全部楼层
DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇?  
如果直接用乙醇会有什么影响?

最好能给出有价值的参考文献什么的
找了一晚上没找到
谢谢了!
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发表于 2008-11-20 08:51:08 |显示全部楼层
我自己的理解是ethanol比isopropanol的molecular weight要小,所以更容易挥发,而且不稳定,所以沉淀时用到的alcohol是isopropanol, 而后来因为要等DNA dry,所以用ethanol更快。(这个纯粹是我自己在做miniprep的时候想的,所以楼主不到最后不要用)

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囧章 Gemini双子座 枫情万种 一帆枫顺   枫华绝代 荣誉版主

发表于 2008-11-20 11:42:30 |显示全部楼层
原则上讲我应该是知道答案的
因为异丙醇和DNA亲和性好 用来分离
乙醇的亲和性差 适合挥发
但我实在找不到什么出处
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发表于 2008-11-22 06:35:57 |显示全部楼层
我印象中谁告诉我不用异丙醇的话~ 会飘~

具体的忘了
True love never runs smooth.

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发表于 2008-11-22 09:28:39 |显示全部楼层
DNA在异丙醇的溶解度更低,所以用异丙醇来沉淀更完全,而后由于异丙醇不易挥发,所以用乙醇洗去异丙醇,乙醇挥发快
个人见解

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发表于 2008-11-22 16:41:43 |显示全部楼层
一般片段小于500bp我才用异丙醇,抽屉质粒之类的就直接上乙醇

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发表于 2008-11-22 21:28:14 |显示全部楼层
同意5楼的观点

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学习了,:)

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发表于 2009-1-20 13:07:06 |显示全部楼层
5楼正解
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囧章 Gemini双子座 枫情万种 一帆枫顺   枫华绝代 荣誉版主

发表于 2009-1-21 05:42:48 |显示全部楼层
唉 发个最终版的答案吧 反正是老师最后说的
异丙醇和DNA的亲和性高 可以用更少的量来沉淀
但同时异丙醇和盐的亲和性也高  所以用乙醇把盐洗出去
可惜我到最后也没找到引用文献 随便引了个分子克隆手册就交了
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发表于 2009-1-21 20:51:50 |显示全部楼层
直接用乙醇就行,别用异丙醇了。

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发表于 2009-1-22 02:30:20 |显示全部楼层
直接用乙醇就行,别用异丙醇了。
zhouxfd 发表于 2009-1-21 20:51


确实可以
但问为什么用异丙醇是我们final report里面一道小题。。。
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发表于 2009-1-30 03:57:42 |显示全部楼层
Iso is used to precipitate the DNA, EoTH is to used to get rid of the salt. You can also use EoTH to precipitate DNA, but it takes longer.
I will go...

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囧章 Gemini双子座 枫情万种 一帆枫顺   枫华绝代 荣誉版主

发表于 2009-1-30 04:50:46 |显示全部楼层
求求大家别回复这个帖子了 我已经知道答案n久了 那门课的成绩都出来2个月了。。。
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14# Guessy
那你说说到底是为什么,要把问题解决了啊

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RE: 技术问题: DNA沉淀时为什么先用异丙醇再用乙醇? [修改]

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